温阳活血利水方对被动型Heymann肾炎大鼠足细胞的影响

作者：薛雪; 吴健; 付彤飞; 谭瑶; 袁军^*

来源：中华中医药杂志, 2023, 38(02): 603-608.

• 温阳活血利水方
• 特发性膜性肾病
• 机制
• 足细胞

目的：观察温阳活血利水方药对被动型Heymann肾炎（PHN）模型大鼠的干预作用，并探讨该方药的疗效机制。方法：雄性SD大鼠60只，随机分为正常对照组、PHN模型组、温阳活血利水组、他克莫司组，每组15只。以尾静脉注射Anti-Fx1A血清法构建IMN模型。检测各组大鼠24h尿蛋白定量、血清总蛋白、血清白蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、血肌酐、胆固醇及甘油三酯水平。采用免疫荧光法检测肾小球Klotho、瞬时受体电位通道6(TRPC6)、组织蛋白酶L(CatL)及其底物Synaptopodin表达；采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测肾皮质Ras同源基因家族成员（Rho）A、Rho关联含卷曲螺旋蛋白激酶（ROCK）1与ROCK2的活性；采用Western blot方法检测肾皮质磷酸化LIM结构域激酶p-LIMK1、磷酸化后p-cofilin蛋白的表达。光镜下观察肾脏病理形态学变化，电子显微镜下观察肾小球足细胞足突及电子致密物变化情况。结果：与正常对照组比较，干预4周后PHN模型组24h尿蛋白定量、血清胆固醇与甘油三酯水平显著升高（P<0.01），血清白蛋白水平显著下降（P<0.01）；肾小球Klotho及Synaptopodin的表达显著下调（P<0.01）,RhoA、ROCK1、ROCK2活性显著升高（P<0.01）,TRPC6、CatL、p-LIMK1/LIMK1及p-cofilin/cofilin表达显著上调（P<0.01）；足细胞足突弥漫性融合，足细胞下电子致密物沉积。与PHN模型组比较，干预4周后温阳活血利水组血清白蛋白显著升高（P<0.05）,24h尿蛋白定量与血清甘油三酯水平显著下降（P<0.05,P<0.01）；肾小球Klotho及Synaptopodin表达显著上调（P<0.01）,RhoA、ROCK1、ROCK2活性显著下降（P<0.01）,TRPC6、CatL、p-LIMK1/LIMK1与p-cofilin/cofilin表达显著下调（P<0.01）；足突融合改善，足细胞下电子致密物沉积减轻。结论：Klotho/TRPC6/CatL/Synaptopodin/RhoA/ROCK/LIMK/cofilin信号通路表达异常可能参与了IMN的发病过程；温阳活血利水方药能够减少IMN大鼠蛋白尿，调整足细胞形态，其作用机制或与调控该通路有关。

• 单位
  湖北中医药大学; 湖北省中医院; 第一临床学院