抗猪SIgA单克隆抗体的研制

作者：吴胜昔; 姜平; 李玉峰

来源：中国兽医学报, 2005, (04): 390-393.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2005.04.019

• 猪SIgA
• 单克隆抗体
• 层析技术 porcine SIgA
• monoclonal antibodies
• chromatography

采用饱和硫酸铵盐析、SephadexG-200柱层析和离子交换柱层析技术,从猪初乳中提纯分泌型IgA(SIgA)。经SDS-PAGE电泳鉴定,纯化的SIgA达到电泳纯。以此纯化的SIgA,采用长程免疫法免疫BALB/c小鼠,取4次免疫后的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞用PEG-1500进行细胞融合,第1次融合率为79.7%,第2次融合率为60.3%。建立间接ELISA,用于检测杂交瘤细胞上清中的单克隆抗体,初检阳性率分别为4.1%、16.8%。经2次亚克隆反复筛选获得了2株能稳定分泌抗猪SIgA单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为CA6、5D4。ELISA和Western-blotting证实,所获...

• 单位
  南京农业大学; 农业部