水杨酸刺激下半夏试管块茎悬浮培养及其生物碱的含量

作者:陶兴魁; 黄铭美; 薛建平*; 张爱民; 张兴桃; 王海潮
来源:中国实验方剂学杂志, 2019, 25(18): 139-144.
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.20191814

摘要

目的:研究水杨酸刺激下半夏试管块茎悬浮培养及其体内生物碱含量的变化。方法:以半夏悬浮试管小块茎为材料,对其处理不同浓度的外源水杨酸刺激,分析块茎的生长情况,利用高效液相色谱法(HPLC)测定块茎中生物碱的含量。检测采用Agilent C18色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水(4∶96),柱温35℃,肌苷检测波长250 nm,鸟苷检测波长260 nm,流速1. 0 m L·min-1,进样量10μL。结果:外源添加不同浓度的水杨酸,处理不同的时间,半夏块茎的鲜重在第25天,水杨酸150μmol·L-1时达到最大7. 483 8 g。同时积累了一定量的生物碱,鸟苷在0. 03~0. 45μg(R2=0. 999 6)线性关系良好,当水杨酸浓度为50μmol·L-1时,培养10 d,半夏块茎中鸟苷的质量分数达到最大值1. 353 3 mg·g-1;肌苷在0. 003~0. 045μg(R2=0. 999 5)线性关系良好,在水杨酸浓度为200μmol·L-1时,培养30 d,半夏块茎中肌苷的质量分数达到最大值0. 149 8 mg·g-1。结论:该研究结果为半夏试管块茎的组培快繁和生物碱的调控研究提供参考,对半夏产业的发展具有十分重要的意义。

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