抗O型口蹄疫病毒猪源单链抗体的筛选

作者：李德山; 胡爽; 赵文漾; 李青青; 郭笑辰; **; 任桂萍; 尹杰超

来源：东北农业大学学报, 2020, 51(01): 42-49.

DOI：10.19720/j.cnki.issn.1005-9369.2020.01.005

• 口蹄疫
• 单链抗体
• 细菌展示
• 流式细胞术

为获得抗O型口蹄疫病毒(FMDV)高亲和力猪源单链抗体(scFv),建立抗原抗体(Ag-Ab)共表达细菌展示文库,抗原为FMDV结构蛋白VP1、抗体为高免猪抗体文库。采用细菌展示与流式细胞术结合方法,筛选出14株抗FMDV的scFv。将筛选获得scFv构建至pET28a载体中,经E. coli Rosetta表达,目的蛋白长度约为30ku,与scFv分子质量相符。Western blot结果表明,14株scFv均可与VP1特异性结合。ELISA结果表明,14株scFv均可与灭活O型FMDV特异性结合。应用共表达细菌展示技术,可避免抗原制备,简化操作流程,适用范围广泛;应用流式细胞仪筛选抗体库,可实现准确、快速、高通量筛选。抗FMDV猪源scFv研究可填补同源基因工程抗体空白,为进一步筛选中和抗体奠定基础。

• 单位
  东北农业大学; 生命科学学院