摘要
目的探讨miR-29b对肺癌细胞增殖和凋亡的影响及其与髓细胞白血病因子-1(Mcl-1)蛋白表达的关系。方法采用实时定量PCR检测18例肺癌组织、癌旁正常组织以及人非小细胞肺癌株SPC-A1中miR-29b表达情况;Western blotting实验检测SPC-A1细胞中Mcl-1蛋白水平;双荧光素酶实验验证miR-29b与Mcl-1的相关性;MTT增殖实验检测miR-29b对SPC-A1细胞增殖能力的影响;细胞凋亡实验检测miR-29b对SPC-A1细胞凋亡的影响。结果肺癌组织miR-29b表达水平低于癌旁正常组织(P<0.05)。miR-29b mimics组miR-29b的表达水平和细胞凋亡率高于对照组(P<0.05),miR-29b inhibitor组低于对照组(P<0.05)。培养72 h和96 h时,miR-29b mimics组的增殖活性显著低于对照组(P<0.05)。培养96 h时,miR-29b inhibitor组的增殖活性明显高于对照组(P<0.05)。生物信息学软件预测结果显示,miR-29b与Mcl-1有类似的3’-UTR结合序列。双荧光素酶实验结果显示,转染miR-29b mimics后可以明显抑制Mcl-1的荧光素酶活性。miR-29b mimics组Mcl-1蛋白表达水平低于对照组(P<0.05),miR-29b inhibitor组高于对照组(P<0.05)。结论 miR-29b能抑制肺癌细胞增殖并诱导其凋亡,还能与Mcl-1的3’-UTR特异性结合,并抑制Mcl-1蛋白的表达活性。
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单位四川省人民医院; 四川省医学科学院