融合自杀基因CDglyTK治疗喉癌的体外实验研究(英文)

作者:唐瑶云; 徐婧; 刘建平; 郑颂扬; 赵素萍; 张俊毅; 肖健云
来源:中国现代医学杂志, 2006, (12): 1766-1771.

摘要

目的研究融合自杀基因CDglyTK治疗喉癌。方法PCR扩增、酶切、连接、转化等构建质粒表达载体pcDNA3.1(-)CMV.CDglyTK,XhoⅠ/HindⅢ酶切鉴定,测序分析CDglyTK基因序列。建立稳定表达CDglyTK基因的Hep-2细胞株,RT-PCR及Western-blotting鉴定CDglyTK基因的表达。MTT法观察5-FC、GCV、5-FC+GCV对表达CDglyTK基因的Hep-2细胞生长的抑制作用。结果酶切和基因测序分析证明重组质粒含完整的CD及TK基因,RT-PCR从转染细胞总RNA中扩出707bp的预期片段,West-ern-blotting检测到该基因表达的59kDa的蛋白。表达CDglyTK基因的Hep-2细胞在5-FC、GCV、5-FC+GCV干预下生长受到抑制,5-FC与GCV联合有更强的杀伤效应。结论CDglyTK融合自杀基因可以成为基因治疗喉癌的有效方法。