摘要
目的评价异氟醚预处理对大鼠肾缺血再灌注时细胞凋亡的影响。方法 SD雄性大鼠30只, 体重300~320 g, 12~14周龄, 采用随机数字表法将其分为3组(n=10):假手术组(S组)、肾缺血再灌注组(I/R组)和异氟醚预处理+肾缺血再灌注组(Iso+ I/R组)。采用右肾切除、左肾蒂夹闭30 min时恢复灌注的方法建立肾缺血再灌注损伤模型。Iso+I/R组在密闭麻醉箱中吸入1.5%异氟醚(O2 2 L/min)1 h, 洗脱30 min后制备模型。其余两组吸入O2 2 L/min 1 h。于再灌注2 h时采集腹主动脉血样3 ml, 测定血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、胱抑素C(CysC)浓度;取左肾组织, 采用TUNEL法检测细胞凋亡情况, 计算凋亡指数(AI);采用实时荧光定量PCR法检测p53 mRNA、Bax mRNA和Bcl-2 mRNA表达水平, 采用Western blot法检测Bax、Bcl-2、caspase-3表达水平, 计算Bcl-2和Bax表达的比值。结果与S组比较, I/R组血清Cr、BUN、CysC浓度升高, Bcl-2和Bax及其mRNA表达上调, Bcl-2/Bax比值降低, caspase-3表达上调, AI增加(P<0.05);与I/R组比较, Iso+I/R组血清Cr、BUN、CysC浓度降低, Bcl-2 mRNA、Bax mRNA和Bax表达下调, Bcl-2/Bax比值升高, caspase-3表达下调, AI降低(P<0.05);各组间p53 mRNA表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论异氟醚预处理减轻大鼠肾缺血再灌注损伤的机制与其调节Bax和Bcl-2平衡、抑制肾细胞凋亡有关。
-
单位北京大学第三医院; 温州医科大学附属第二医院; 福建医科大学附属第一医院