噬菌体展示技术筛选干扰素α启动子DNA结合蛋白

作者：曲建慧成军张玲霞钟彦伟刘妍王琳戴久增

来源：中华肝脏病杂志, 2005, (07): 520-523.

DOI：10.3760/j.issn:1007-3418.2005.07.012

• 细菌噬菌体T7
• 干扰索α 启动区(遗传学) Bacteriophage T 7
• Interferon-alpha
• Promoter regions (genetics)

目的筛选干扰素α(IFN α)启动子DNA结合蛋白,探讨IFN α基因表达调节的分子生物学机制。方法应用噬菌体展示技术,以IFN α启动子的聚合酶链反应产物作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行5轮“吸附-洗脱-扩增”过程,经噬斑的PCR扩增后,构建克隆载体,最后对所筛选克隆进行DNA序列分析和同源性搜索。结果噬菌体经富集后,随机挑选40个克隆,成功构建了克隆载体,序列测定后经过同源性搜索,确定了和IFN α启动子结合的肝细胞蛋白,筛选到17种与IFN α启动子具有结合作用的蛋白。结论多种具有不同生理、生化功能的蛋白与IFN α启动子具有结合作用。

• 单位
  解放军第302医院; 北京地坛医院