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摘要
本试验旨在研究植物提取物复合制剂对脂多糖（LPS）诱导的奶牛乳腺上皮细胞（BMEC）炎症模型免疫、抗氧化功能和转录组的影响，以揭示植物提取物复合制剂缓解BMEC炎症反应的分子机制。试验选用第3代贴壁生长BMEC，随机分为5组，每组8个重复，每个重复1个培养孔。对照组BMEC不添加LPS和植物提取物复合制剂，采用基础培养基培养10 h;LPS组BMEC添加10μg/mL LPS作用6 h后，采用基础培养基培养4 h；试验组BMEC加入10μg/mL LPS作用6 h后，分别加入30 (WELPS30组)、 50 (WELPS50组)及70μg/mL(WELPS70组)的植物提取物复合制剂，采用基础培养基培养4 h。测定各组免疫及抗氧化相关指标，并选择LPS组和WELPS30组进行转录组测序及分析。结果表明：1) LPS组BMEC相对增殖率显著低于对照组（P<0.05）,WELPS30组BMEC相对增殖率显著高于LPS组（P<0.05），且WELPS30组、WELPS50组和WELPS70组BMEC中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及白细胞介素-8(IL-8)含量显著低于LPS组（P<0.05）。2)LPS组BMEC中丙二醛（MDA）含量和诱导性一氧化氮合酶（iNOS）活性显著高于对照组（P<0.05）,WELPS30组、WELPS50组和WELPS70组BMEC中MDA含量和iNOS活性显著低于LPS组（P<0.05）,WELPS30组BMEC中总超氧化物歧化酶（T-SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及总抗氧化能力（T-AOC）显著高于LPS组（P<0.05）。3）转录组测序结果表明，共有369个差异表达基因。GO富集分析显示，差异表达基因主要参与调节白细胞介素-17(IL-17)生成、白细胞介导的细胞毒素作用、T细胞增殖等生物学过程。KEGG富集分析显示，差异表达基因主要集中在以NOD样受体（NLR）信号通路和IL-17信号通路为主的免疫相关信号通路。4）以介数中心性为指标进行网络分析，发现Toll样受体2(TLR2)、趋化因子10(CXCL10)和集落刺激因子2(CSF2)等10个基因在植物提取物复合制剂调控的差异表达免疫基因中起到关键连接性作用。由此可见，植物提取物复合制剂可以提高BMEC抗氧化功能，缓解BMEC炎症反应，其分子机制是植物提取物复合制剂通过调节IL-17信号通路和NLR信号通路缓解BMEC的炎症反应，TLR2、CXCL10和CSF2等10个基因在差异表达免疫基因中起到关键性的连接作用。
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单位内蒙古农牧业科学院; 动物科学学院; 内蒙古农业大学
