冬凌草甲素逆转BEL-7402/5-FU化疗耐药作用的体内研究

作者：史**^*; 王永生; 何国浓; 叶兴涛; 施航; 陈如儿

来源：浙江中西医结合杂志, 2023, 33(10): 888-908.

• 冬凌草素
• 肝癌
• 耐药
• Hippo信号通路

目的 探讨冬凌草甲素逆转人肝癌耐药细胞株BEL-7402/5-FU裸鼠移植瘤耐药效应及机制。方法 取4～6周龄BALB/c雌性裸小鼠40只,皮下接种BEL-7402/5-FU细胞,建立BEL-7402/5-FU裸鼠移植瘤耐药模型,按照随机数字表法分成八组,即模型组,冬凌草甲素高、中、低剂量组,5-FU组和5-FU+冬凌草甲素高、中、低剂量组,每组5只。分组当天开始灌胃给药,模型组给予生理盐水灌胃,冬凌草甲素高、中、低剂量组给予75、50、25 mg/(kg·d)冬凌草甲素溶液灌胃。5-FU组给予20 mg/(kg·d)5-FU腹腔注射。5-FU+冬凌草甲素高、中、低剂量组给予20 mg/(kg·d)5-FU腹腔注射,联合75、50、25 mg/(kg·d)冬凌草甲素溶液灌胃,每日1次,连续5 d。观察各组瘤重及抑瘤率,实时荧光定量PCR法检测各组肿瘤组织中Yes相关蛋白(YAP)、具有PDZ结合域的转录共刺激因子(TAZ)的mRNA表达水平,Western blot法检测各组肿瘤组织中细胞周期蛋白D1(CyclinDl)、结缔组织生长因子(CTGF)、生存素(Survivin)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达水平。结果 40只裸鼠均成瘤,成瘤率100%。和模型组比较,各组均有明显的抑瘤率[(1.079±0.307)g、(1.240±0.250)g、(1.386±0.329)g、(0.783±0.194)g、(0.382±0.214)g、(0.603±0.204)g、(0.897±0.317)g比(1.852±0.584)g,P<0.05或P<0.01],其中5-FU+冬凌草甲素高剂量组抑瘤率最为明显(P<0.01)。与模型组比较,5-FU组、5-FU+冬凌草甲素高、中、低剂量组的YAP和TAZ mRNA相对表达量均显著降低[YAP:(0.319±0.142)、(0.242±0.120)、(0.231±0.114)、(0.267±0.053)比(1.003±0.093);TAZ:(0.542±0.222)、(0.225±0.114)、(0.416±0.185)、(0.446±0.147)比(1.003±0.096),P<0.05或P<0.01],而5-FU+冬凌草甲素高剂量组的TAZ mRNA相对表达量降低最为明显(P<0.01)。与模型组相比,冬凌草甲素中剂量组、5-FU+冬凌草甲素高、中剂量组的CyclinDl、CTGF、Survivin、Bcl-2蛋白表达量不同程度降低[CyclinDl:(0.333±0.050)、(0.284±0.033)、(0.336±0.053)比(0.445±0.087);CTGF:(0.089±0.007)、(0.041±0.013)、(0.049±0.007)比(0.171±0.025);Survivin:(0.293±0.062)、(0.185±0.056)、(0.289±0.026)比(0.386±0.060);Bcl-2:(0.356±0.053)、(0.175±0.034)、(0.374±0.057)比(0.472±0.049),P<0.05或P<0.01],而5-FU+冬凌草甲素高剂量组的蛋白相对表达量显著降低(P<0.01)。结论 冬凌草甲素可抑制BEL-7402/5-FU裸鼠移植瘤生长,其逆转耐药机制可能与降低YAP、TAZ的mRNA表达,降低CyclinDl、CTGF、Survivin、Bcl-2蛋白表达有关。

• 单位
  浙江省宁波市中医院