等离子诱变Trametes sanguinea WTFA5产漆酶培养基优化及酶学性质研究

作者:杜杰克; 张川川; 李沙; 袁海波; 刘洪玲; 王腾飞*
来源:齐鲁工业大学学报, 2021, 35(03): 19-27.
DOI:10.16442/j.cnki.qlgydxxb.2021.03.004

摘要

以愈创木酚-YPD培养基筛选产漆酶菌株,用等离子诱变、单因素和正交实验法提高其产漆酶效率,以活性电泳法纯化漆酶。筛选到一株产漆酶的血红栓菌Trametes sanguinea WTFA5;等离子诱变后获得遗传稳定的突变株T.sanguinea WTFS4,使发酵时间由10 d缩短至9 d,并且漆酶酶活由123.2 U/L提高至228.5 U/L;培养基优化后的最优组合为:葡萄糖40 g/L、豆粕粉20 g/L、铜离子6 mmol/L、2,5-二甲基苯胺20μmol/L,以此培养基进行发酵,S4菌发酵周期缩短至5 d,酶活提高至40 000 U/L。通过对漆酶进行纯化,测得漆酶最适pH为3.0,最适温度为25℃,Km为(58.76±5.33)μmol/L,Kcat为(13.89±0.01) s-1。等离子诱变和培养基优化可以显著提高T.sanguinea产漆酶效率。

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