淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方介导铁调素对HT22细胞中ADAM17表达的影响

作者：董贤慧; 贺小平; 张天赐; 马冬雪; 李嘉琪; 刘晓晓; 李浩^*; 高维娟^*

来源：中国中药杂志, 2021, 46(23): 6224-6230.

DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20210907.701

• 阿尔茨海默病
• 淫羊藿
• 黄芪
• 葛根
• 铁调素
• HT22细胞

我国阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease, AD)患者的人数呈现井喷式发展,由此产生的医疗负担和照料需求对个人、家庭、社会的发展产生巨大影响。淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方(YHG)可以调节铁代谢相关蛋白的表达抑制AD脑铁超载,缓解脑铁超载带来的中枢神经系统功能衰退。铁调节激素(hepcidin)是调节铁代谢的重要靶点,该实验探索YHG介导hepcidin对HT22细胞中β淀粉样前体蛋白(APP)水解中关键酶解整合素金属蛋白酶17(a disintegrin and metalloprotease-17,ADAM17)表达的影响。体外培养HT22细胞,利用脂质体介导的siRNA转染沉默HT22细胞中hepcidin表达,real-time PCR和Western blot确定hepcidin基因沉默效果并检测YHG对AD细胞模型hepcidin蛋白的影响。将HT22细胞随机分7组:正常组(control)、Aβ25-35诱导组(Aβ)、hepcidin-siRNA组(siRNA)、Aβ25-35+hepcidin-siRNA组(Aβ+siRNA)、Aβ25-35+YHG处理组(Aβ+YHG)、hepcidin-siRNA+YHG处理组(siRNA+YHG)和Aβ25-35+hepcidin-siRNA+YHG组(Aβ+siRNA+YHG)。采用real-time PCR法检测细胞中ADAM17 mRNA的表达,免疫荧光和Western blot检测细胞中ADAM17蛋白的表达。免疫荧光结果显示,与control组比较,Aβ组、siRNA组和Aβ+siRNA组中的ADAM17蛋白表达降低(P<0.05);与Aβ组比较,Aβ+siRNA组中ADAM17蛋白表达降低(P<0.05),Aβ+YHG组中ADAM17蛋白表达增高(P<0.05);与siRNA组比较,Aβ+siRNA组中的ADAM17蛋白表达降低(P<0.05),siRNA+YHG组中的ADAM17蛋白表达增高(P<0.05);与Aβ+siRNA组比较,Aβ+siRNA+YHG组中的ADAM17蛋白表达增高(P<0.05);Western blot及real-time PCR结果与免疫荧光结果一致。实验结果表明,YHG通过诱导hepcidin上调AD细胞模型ADAM17的表达,促进非淀粉代谢通路的激活,这可能是YHG防治AD的内在机制。

• 单位
  河北中医学院; 中国中医科学院西苑医院