叶下珠复方Ⅱ号对肝癌Huh7细胞增殖、凋亡与自噬的影响

作者：杜欣芸; 李常青^*; 陈滨; 李小翚

来源：中国实验方剂学杂志, 2019, 25(02): 48-54.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20182422

• 叶下珠复方Ⅱ
• 增殖
• 凋亡
• 自噬
• Huh7细胞

目的:观察叶下珠复方Ⅱ号对肝癌Huh7细胞增殖、凋亡与自噬的影响,进一步探讨其抗肝癌的作用机制。方法:体外培养肝癌Huh7细胞,设空白组,叶下珠复方Ⅱ号高、低质量浓度组(40,20 g·L-1)和5-氟尿嘧啶(5-FU)(0. 04 g·L-1)组,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测叶下珠复方Ⅱ号对肝癌Huh7细胞增殖的影响,流式细胞仪检细胞凋亡变化,单丹磺酰尸胺(MDC)染色观察药物作用后细胞自噬体的变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K),丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶2(Akt2),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和微管相关蛋白1轻链3(LC3Ⅱ) mRNA表达的改变,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Akt2和LC3Ⅱ蛋白表达的变化。结果:叶下珠复方Ⅱ号(40,20 g·L-1)可显著抑制肝癌Huh7细胞,并诱导其凋亡,凋亡率分别为51. 72%,19. 74%,显著高于空白组(P <0. 01)。采用MDC染色后,叶下珠复方Ⅱ号(40,20 g·L-1)组可见大量自噬体的形成。与空白组比较,叶下珠复方Ⅱ号高、低剂量组PI3K,Akt2,Bcl-2 mRNA表达均显著下降,LC3ⅡmRNA表达均显著增加(P <0. 01)。与空白组比较,叶下珠复方Ⅱ号(40,20 g·L-1)组处理后的Akt2蛋白表达显著下降,LC3Ⅱ蛋白表达明显增加(P <0. 05,P <0. 01)。结论:叶下珠复方Ⅱ号对肝癌Huh7细胞增殖有明显的抑制作用,其作用机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路活化从而诱导细胞凋亡和自噬有关。

• 单位
  广州中医药大学热带医学研究所