摘要
目的寻找肾癌早期诊断和靶向治疗的标志物。方法以肾癌细胞株A498为靶细胞,正常肾细胞株HK-2为吸附细胞,37℃下对噬菌体十二肽库进行4轮减性筛选。挑取单克隆采用ELSA方法初步鉴定噬菌体克隆亲和力;阳性克隆提取质粒,测序后合成多肽,鉴定多肽的亲和力及特异性。结果经ELISA初步鉴定,随机挑选20个单克隆中,2号多肽对A498细胞亲和力最高(A_(ZT-2)/A_(对照)比值为3.15),命名为Phage-ZT-2。细胞免疫荧光试验证明,合成的相应多肽FITC-ZT-2对A498细胞具有特异性结合。利用荧光标记的ZT-2检测肾癌组织芯片,肾癌组织ZT-2的荧光吸光度(A)值为0.453±0.123,正常组织及非肾癌炎性组织为0.148±0.075,2组间比较差异有统计学意义(t=2.776,P<0.01)。结论成功筛选出与肾癌细胞特异性结合的多肽ZT-2,为肾癌的早期诊断和靶向治疗提供了实验依据。
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单位中山大学附属第一医院; 广东药学院