摘要
产油酵母的油脂合成是高度耗氧的生物过程,为提高油脂合成过程中细胞利用氧气的能力,将透明颤菌的血红蛋白基因vgb整合到油脂高产菌株圆红冬孢酵母(Rhodosporidium toruloides,R.toruloides)的染色体中.首先构建了透明颤菌血红蛋白基因vgb表达载体pZPK-PPGK-hyg-TNOS-PGPD-vgb-THSP,再通过农杆菌介导转化的方法将其转化至R.toruloides NP11中,获得重组菌株.Western blot和CO差异光谱分析表明,透明颤菌血红蛋白在R.toruloides NP11中成功表达并且具有生物活性.摇瓶发酵结果表明:与出发菌株相比,在氧气充足条件下,重组菌株NG-21的油脂产量提高了18%;在氧气不足条件下,重组菌株NG-22的油脂产量提高了28%;在限氧和不限氧的条件下,透明颤菌血红蛋白均能够促进圆红冬孢酵母的油脂积累.
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单位中国科学院大连化学物理研究所; 生物工程学院; 大连工业大学