扁蒴藤素对人结直肠癌细胞HCT116和HT29增殖、迁移和细胞周期的影响及作用机制研究

作者：吕蒙莹; 罗照勇; 王维民; 梁巧玲; 王杨; 钱亚云; 刘延庆^*

来源：实用临床医药杂志, 2022, 26(13): 60-67.

• 扁蒴藤素
• 结直肠癌
• 增殖
• 迁移
• 细胞周期
• 信号通路

目的 探讨扁蒴藤素对人结直肠癌HCT116细胞和HT29细胞增殖、迁移和细胞周期的影响，并初步探索潜在的分子机制。方法 采用噻唑蓝(MTT)实验于不同时点分别检测不同浓度扁蒴藤素对HCT116细胞和HT29细胞存活率的影响；采用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)实验分别检测不同浓度扁蒴藤素对HCT116细胞和HT29细胞增殖能力的影响；采用Transwell实验观察不同浓度扁蒴藤素对HCT116细胞和HT29细胞迁移能力的影响；采用流式细胞术检测扁蒴藤素对HCT116细胞和HT29细胞周期的影响；采用蛋白质印迹法(Western blot)检测扁蒴藤素对HCT116细胞与HT29细胞周期相关蛋白cyclin E1、CDK2、p53、p21、p27表达和PI3K/Akt/mTOR信号转导通路相关蛋白表达的影响。结果 MTT实验结果显示，经不同浓度扁蒴藤素分别处理12、24、36、48、60 h后，HCT116细胞和HT29细胞的存活率均较对照细胞降低，且呈时间和浓度依赖性。EdU实验结果显示，经0.5、1、2μmol/L扁蒴藤素处理24 h后，HCT116细胞中阳性细胞率低于对照组，差异有统计学意义(P<0.001);经1、2、4μmol/L扁蒴藤素处理24 h后，HT29细胞中阳性细胞率低于对照组，差异有统计学意义(P<0.001)。Transwell实验结果显示，加入0.5、1、2μmol/L扁蒴藤素作用24 h后，HCT116细胞穿透小室底膜的数量变少，且细胞迁移率低于对照细胞，差异有统计学意义(P<0.001);加入1、2、4μmol/L扁蒴藤素作用24 h后，HT29细胞穿透小室底膜的数量变少，且细胞迁移率低于对照细胞，差异有统计学意义(P<0.001)。流式细胞术结果显示，扁蒴藤素可诱导HCT116细胞和HT29细胞发生G0/G1期阻滞。Western blot结果显示，与对照细胞比较，HCT116细胞和HT29细胞经扁蒴藤素处理后p53、p21、p27蛋白表达量增加，cyclin E1、CDK2蛋白表达量降低，且p-PI3K、p-Akt、mTOR和p-mTOR蛋白表达量降低，差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。结论 扁蒴藤素可抑制HCT116细胞和HT29细胞的增殖和迁移，并诱导细胞G0/G1期阻滞，其分子机制可能与PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。

• 单位
  国家中医药管理局; 扬州大学; 转化医学研究院