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摘要
猪非典型瘟病毒(APPV)是新近发现的仔猪先天震颤的病原体,其血清学检测方法亟待建立。Erns蛋白是APPV诱导机体产生中和抗体的重要保守性抗原,是血清学检测的特异性靶标之一。本研究制备了猪非典型瘟病毒原核表达的Erns蛋白,以其作为包被抗原,建立了间接ELISA检测方法。结果表明,最佳抗原包被浓度为8 μg/mL,最佳血清稀释度为1∶10,阴阳性临界值D450=0.318,灵敏度达到1∶64,特异性好,与猪瘟、猪伪狂犬、猪繁殖与呼吸障碍综合征、猪流感及圆环病毒病的阳性血清均不发生交叉反应。该检测方法重复性好,批内变异系数最大值为7.84%,批间变异系数最大值为8.57%。利用建立的间接ELISA方法对50份猪临床血清样本进行了检测,其阳性率为10%。基于Erns蛋白间接ELISA检测方法的建立为APPV的流行病学调查和临床诊断提供了有效的工具。
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