积雪草苷对Ⅱ型心肾综合征小鼠肾脏保护作用及其机制

作者：张玉明; 徐臣年; 唐赛男; 罗明华; 李婕; 夏麟^*

来源：山西医科大学学报, 2023, 54(07): 972-979.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2023.07.013

• 心肾综合征
• 积雪草苷
• 自噬
• Notch1/NRG1
• 小鼠

目的 探讨积雪草苷(ASI)通过跨膜受体蛋白Notch1/神经调节蛋白-1(Notch1/NRG1)信号调控自噬对Ⅱ型心肾综合征(CRS)小鼠肾脏的保护作用及机制。方法 将100只8周龄C57/BL6小鼠随机分为4组，每组25只，分别为对照组(sham组)、Ⅱ型CRS模型组(CRS组)、ASI干预组(CRS+ASI组)、ASI联合Notch1受体抑制剂DAPT干预组(CRS+ASI+DAPT组)。CRS组、CRS+ASI组和CRS+ASI+DAPT组小鼠开胸结扎腹主动脉建立Ⅱ型CRS模型，sham组采用纵劈胸骨术式，逐层分离组织至主动脉弓后，不作处理，后逐层关闭胸腔。手术后CRS+ASI组给予腹腔注射ASI[10 mg/(kg·d)],CRS+ASI+DAPT组给予腹腔注射ASI[10 mg/(kg·d)]及DAPT[10 mg/(kg·d)],sham组及CRS组腹腔注射同体积的生理盐水。2个月后取材，检测小鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)、血清肌酐(Scr)、尿素氮(UN)评价心肾功能，心脏超声检测左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)、左心室舒张末期内径(LVEDd)、左心室舒张末期容积(LVEDV),HE染色、Masson染色观察肾脏组织形态变化及纤维化程度，TUNEL染色检测各组细胞凋亡情况，Western blot检测肾脏组织Notch1、NRG1以及自噬相关蛋白LC3B、Beclin1、Atg5的表达，免疫荧光染色法检测肾脏组织自噬相关蛋白LC3B的表达。结果 与sham组相比，CRS组肾脏组织肾小球萎缩，血清中LDH、Scr、UN水平显著升高(P<0.05),细胞凋亡率明显增加(P<0.05),自噬相关蛋白Atg5、LC3B和Beclin1表达显著升高(P<0.05),Notch1、NRG1的表达降低(P<0.05),免疫荧光结果显示自噬相关蛋白LC3B相对荧光强度增加(P<0.05)。与CRS组相比，CRS+ASI组肾小球形态明显改善，血清中LDH|、Scr、UN含量降低(P<0.05),细胞凋亡率减少(P<0.05),Atg5、LC3B和Beclin1的表达减少(P<0.05),Notch1、NRG1的表达升高(P<0.05),免疫荧光染色自噬相关蛋白LC3B相对荧光强度降低(P<0.05)。与CRS+ASI组相比，CRS+ASI+DAPT组肾脏组织肾小球萎缩，血清中LDH|、Scr、UN水平显著升高(P<0.05),细胞凋亡率明显增加(P<0.05),Atg5、LC3B和Beclin1表达显著升高(P<0.05),而Notch1、NRG1的表达降低(P<0.05),免疫荧光结果显示LC3B相对荧光强度增加(P<0.05)。结论 ASI可能通过调节Notch1/NRG1信号减轻自噬改善Ⅱ型CRS小鼠肾脏损伤。