即时痰和体外培养条件下结核分枝杆菌sigma因子表达差异分析

作者：江丽娜; 穆成; 孙蕊; 王春花

来源：公共卫生与预防医学, 2023, 34(03): 52-55.

• 结核分枝杆菌
• sigma因子
• 痰液
• 荧光定量PCR(RT-PCR)

目的 为了解sigma因子在即时痰的表达情况，探索与致病性结核分枝杆菌毒力关系密切的sigma因子。方法 选取2018年1～12月天津市结核病控制中心门诊部确诊的结核病患者，对其痰涂片阳性和xpert阳性确诊的肺结核随机选择20份痰阳性标本进行实验。每一例肺结核患者在其开始治疗前收集2份即时痰标本，一份立刻抽提RNA,一份进行体外培养。体外培养的菌株在生长对数期提取RNA。设计13个sigma因子的特异性引物，通过荧光定量PCR(RT-PCR)的方法，分析其在即时痰临床分离株和体外培养株的转录表达差异。以核糖体16s为参照基因，利用2ΔCt分析sigma因子的转录倍数，将稳定表达的sigA作为统计分析的底物，单因素方差ANOVA分析其余sigma因子的表达差异。结果 临床分离菌与H37Rv相比，所有的sigma因子统计分析差异均不显著(P均>0.05);临床分离菌与体外培养株相比，只有sigM表达量最高(P<0.05),统计分析差异显著。结论 sigM在细菌感染的初级阶段转录水平明显增高，但其具体作用还不清楚，可能参与了宿主免疫系统和细菌逃离机制之间的相互平衡。