A型流感病毒H7N9株PA和PAX基因的克隆和真核表达

作者:潘红; 罗斌汉; 罗千慧; 岑曼益; 侯俊达; 赵睿明; 蔡葵蒸*; 蔺国珍*
来源:畜牧兽医科技信息, 2020, (06): 40-42.

摘要

本试验旨在克隆A型流感病毒H7N9株的PA和PAX基因并构建真核表达载体对其进行真核表达。从苏州分离株的鸡胚尿囊液中提取禽流感病毒RNA,通过RT-PCR技术获取PA以及PAX全长基因,经琼脂糖凝胶电泳获得纯化的目的基因;构建目的基因重组真核表达质粒,并利用双酶切及测序鉴定重组质粒;质粒DNA转染293T细胞真核表达,让其表达的蛋白产物通过Western Blot鉴定。其结果成功地在293T细胞内表达了PA与PAX蛋白,为进一步研究A型流感病毒PA与PAX蛋白的功能奠定了基础。