问号状赖型钩端螺旋体LAg42膜蛋白基因的克隆及真核表达研究

作者：刘鱼; 商正玲; 钟琪; 鲍朗

来源：四川生理科学杂志, 2007, 29(01): 6-8.

DOI：10.3969/j.issn.1671-3885.2007.01.003

• 钩端螺旋体
• lag42基因
• 克隆
• 转染

目的:构建赖型钩端螺旋体lag42基因真核表达载体并转染哺乳动物细胞,为进一步研究奠定基础。方法:分别以问号状赖型钩体017株,56601株及双曲钩体PatocI株基因组为模板PCR扩增目的基因。构建lag42基因与质粒pcDNA3.1A+的重组真核表达质粒,克隆筛选并测序;通过脂质体介导将重组质粒转染入COS7细胞,用RT-PCR检测转染结果。结果:不同毒力赖型钩体均能扩增出约1100 bp的片段,而PatocI株则未能扩增出目的片段;PCR、双酶切及测序证实pcDNA3.1A+-lag42构建成功;经RT-PCR检测证实重组质粒转染成功。结论:赖型钩体具有编码LAg42膜蛋白的基因,构建完成真核表达载体pcD-NA3.1A+-lag42,并成功转染COS7细胞。

• 单位
  华西医学中心; 四川大学