仙台病毒颗粒数实时荧光定量PCR检测方法的建立及验证

作者：张晓焕; 苏文浩; 任秀秀; 赵婷婷; 王轶男; 卫江波^*

来源：中华实验和临床病毒学杂志, 2019, (06).

• 仙台病毒
• 实时荧光定量PCR
• 重组载体疫苗

目的 建立并验证仙台病毒颗粒数的real-time qPCR检测方法。方法 提取仙台病毒核酸和扩增仙台病毒N基因并构建重组质粒作为参考品,建立TaqMan探针法real-time qPCR方法,并进行线性、重复性、灵敏度和精密度验证。结果 该方法可以检测到仙台病毒的基因组拷贝数,在1.024 × 103～5 × 1010拷贝数/μl范围内,线性良好,R2>99%；检测样品的加标回收率为84.56% ～119.48%。结论 与传统的检测颗粒数血凝试验相比,此方法的灵敏度更高,重复性更好,定量准确,可用于以仙台病毒为载体的疫苗颗粒数的检测,进而检测疫苗产品的比滴度。