基于UPLC-MS/MS建立早产儿血清25-(OH)D3和3-epi-25-(OH)D3检测新方法及临床初步应用

作者：刘浩; 彭勇; 尹一帆; 叶亮; 陈敏; 苗静琨^*

来源：现代检验医学杂志, 2023, 38(03): 170-175.

• 维生素D
• 3-epi-25-羟维生素D3
• 超高效液相色谱-串联质谱
• 早产儿

目的 建立血清25-羟维生素D3[25-hydroxyvitamin D3, 25-(OH)D3]及3-epi-25-羟维生素D3[3-epi-25-hydroxyvitamin D3, 3-epi-25-(OH)D3]超高效液相色谱-串联质谱检测新方法(ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)，并在早产儿中开展初步应用。方法 采用液-液萃取法提取化合物，五氟苯基丙基(pentafluorophenyl propyl,PFPP)色谱柱分离25-(OH)D3与3-epi-25-(OH)D3；从最低定量限、线性关系、精密度与准确度等四个方面对新建方法进行验证，并对134例早产儿血清样本进行检测分析。结果 25-(OH)D3及3-epi-25-(OH)D3的最低定量限分别为6.05±0.78 nmol/L,1.48±0.20 nmol/L；线性范围3.78～480.00 nmol/L,1.00～128.00 nmol/L；相关系数r2为0.992 2,0.992 8;25-(OH)D3与3-epi-25-(OH)D3低、中、高浓度质控品的日内精密度和日间精密度均小于15.00%；回收率109.92%,102.25%,98.76%;97.75%, 95.25%,99.80%。134例早产儿血清25-(OH)D3平均浓度22.35±13.28nmol/L,3-epi-25-(OH)D3平均浓度5.43±4.35 nmol/L;3-epi-25-(OH)D3占总25-(OH)D3的平均比例为19.96%±12.08%，范围0.00%～60.62%。以25-(OH)D3计算，维生素D(Vitamin D, Vit D)缺乏率、不足率、充足率分别为78.36%,19.40%,2.24%；以总25-(OH)D3计算，Vit D缺乏率、不足率、充足率分别为65.67%,26.12%,8.21%；二者Vit D缺乏率及充足率的比较,差异均有统计学意义(χ2=5.351,1.719,4.823，均P <0.05)。结论 本研究建立的UPLC-MS/MS检测法性能良好且能精准检测早产儿血清25-(OH)D3浓度，在早产儿Vit D评估方面具有较好的应用价值。

• 单位
  重庆医科大学; 重庆市妇幼保健院