摘要
目的改进睾丸支持细胞(Sertoli 细胞)的分离方法及培养条件,探讨 Sertoli 细胞体外诱导异种淋巴细胞凋亡的作用机制。方法取2~4周龄的 SD 大鼠睾丸,采用 V 型胶原酶、胰蛋白酶及脱氧核糖核酸酶二步消化法制备 Sertoli 细胞。用免疫组织化学法(SABC 法)检测 Sertoli 细胞中Fas 配体(FasL)、转化生长因子β1(TGF-β1)、clusterin 的表达;流式细胞仪检测 Sertoli 细胞诱导异种淋巴细胞凋亡情况。结果在分离培养纯化过程中,Sertoli 细胞占培养细胞总数的90%以上,生长状况良好,能稳定表达 FasL、TGF-β1和 clusterin,并且能够诱导异种淋巴细胞发生凋亡。结论应用本实验方法能够稳定获得大量高纯度的 Sertoli 细胞,并且能够发挥其免疫豁免的功能,从而用于细胞联合移植。
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