Gpnmb在小鼠M1和M2型骨髓源性巨噬细胞中表达的差异

作者：周乐天; 刘伏友

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2013, (07): 488-494.

• Gpnmb
• 骨髓源性巨噬细胞
• M1型巨噬细胞
• M2型巨噬细胞
• MMR

目的了解小鼠M1和M2型骨髓源性巨噬细胞(BMMφs)中非转移性黑色素瘤糖蛋白b(Gpnmb)表达的差异。方法原代培养小鼠BMMcps,免疫荧光染色F4/80和流式细胞仪检测CD11b鉴定巨噬细胞;用IFN-γ和LPS诱导BMMφs向M1型分化,用IL-4诱导向M2型分化。实时荧光定量PCR检测M1型巨噬细胞标志物(TNF-α、iNOS)、M2型巨噬细胞标志物(MMR、Arg-1)和Gpnmb的mRNA表达;免疫荧光双染色、Western印迹、流式细胞仪检测Gpnmb与MMR的蛋白表达。结果 (1)免疫荧光染色结果示BMMφs中F4/80高表达;流式细胞仪检测结果示BMMcps中有(92.7±6.1)%细胞表达CD11b,提示BMMφs培养成功;(2)相对于未分化的M0型BMMφs,TNF-α、iNOSmRNA在M1型BMMcps中高表达(P均<0.01),而MMR、Arg-1 mRNA在M2型BMMcps中高表达(P均<0.01),提示原代M1、M2型BMMcps分化成功;(3)M2型BMMcps的Gpnmb mRNA和蛋白表达均较M0型和M1型BMMcps显著增高(P均<0.01);免疫荧光双染色及流式细胞仪结果显示,BMMcps中Gpnmb与MMR共表达,在M2型BMMφs中MMR阳性BMMφs有(83.2±9.7)%表达Gpnmb。结论 M2型BMMφs的Gpnmb表达较M1型BMMcps显著增高,提示Gpnmb可能作为鉴别M1、M2型巨噬细胞的标志物,在巨噬细胞的表型分化中起作用。

• 单位
  中南大学湘雅二医院