特丁基对苯二酚对氯化镧所致原代培养大鼠大脑皮层神经元氧化损伤的拮抗作用

作者：张丽锦; 李英綦; 胡晓宇; 孙亚玲; 高祥; 于淼; 刘诗语; 蔡原^*

来源：环境与健康杂志, 2018, 35(12): 1035-1128.

DOI：10.16241/j.cnki.1001-5914.2018.12.001

• 镧
• 神经元
• 氧化应激
• 活性氧
• 核因子NF-E2相关因子

目的探讨特丁基对苯二酚(tertiary butylhydroquinone,tBHQ)对氯化镧所致原代培养大鼠大脑皮层神经元氧化损伤的拮抗作用。方法将出生24 h内清洁级Wistar大鼠的胎鼠大脑皮质神经元进行原代培养,采用神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫细胞荧光法进行神经元的纯度鉴定;将神经元分别暴露于终浓度为0(对照)、0.125、0.25、0.5 mmol/L氯化镧的DMEM培养基中染毒24 h,同时,设40μmol/L tBHQ与相应浓度氯化镧干预组。采用二乙酰二氯荧光素(DCFH-DA)探针测定神经元内活性氧(ROS)的水平,采用Western blot法测定神经元内核因子NF-E2相关因子(nuclear factor erythroid2-related factor,Nrf2)、谷胱甘肽S转移酶(glutathione S transferase,GST)和超氧化物歧化酶2(superoxide dismutase 2,SOD2)蛋白的表达水平。结果与对照组比较,各浓度氯化镧染毒组原代培养大鼠神经元ROS水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05);且随着氯化镧染毒浓度的升高,原代培养大鼠神经元内的ROS水平呈上升趋势。与相同浓度氯化镧组比较,0.25、0.5 mmol/L氯化镧+40μmol/L t BHQ干预组原代培养大鼠神经元的ROS水平均较低,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,各浓度氯化镧组神经元内Nrf2、GST和SOD2蛋白的表达水平均降低,除0.125 mmol/L氯化镧染毒组外,差异均有统计学意义(P<0.05);且随着氯化镧染毒浓度的升高,原代培养大鼠神经元内Nrf2、GST和SOD2蛋白的表达水平均呈下降趋势。与相同浓度氯化镧组比较,0.125、0.25、0.5 mmol/L氯化镧+40μmol/L tBHQ干预组原代培养大鼠神经元的Nrf2、GST和SOD2蛋白的表达水平均增加,除0.25 mmol/L氯化镧+40μmol/L tBHQ干预组SOD2蛋白的表达水平外,差异有统计学意义(P<0.05)。结论氯化镧可使神经元内ROS水平增加,Nrf2,GST和SOD2的蛋白表达水平减少,造成神经元发生氧化损伤;而tBHQ干预可拮抗镧所致的ROS水平增加、Nrf2及抗氧化蛋白的表达降低,对神经元具有保护作用。

• 单位
  中国医科大学; 公共卫生学院; 华北理工大学