B细胞淋巴瘤-2相关x蛋白抑制肽对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠神经细胞凋亡的抑制作用

作者：赵吉秀; 姜红^*; 崔凯洁

来源：中华围产医学杂志, 2016, 19(07): 536-539.

• 缺氧缺血, 脑
• 寡肽类
• 细胞凋亡
• 大鼠

目的探讨B细胞淋巴瘤-2相关x蛋白抑制肽(Bcl-2 associated x protein inhibitory peptide, BIP)对缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage, HIBD)新生鼠神经细胞凋亡的抑制作用及有效治疗时间窗。方法将7日龄Wistar大鼠104只分为假手术组(n=8)、对照组(n=48)和实验组(n=48)。对照组与实验组建立HIBD模型后在不同时间点分别向侧脑室注射生理盐水(5 μl)和BIP(5 μl, 5 mg/ml), 根据建模后注射药物的时间不同, 将2组分为0、6、12、24、48、72 h共6个亚组(每组8只)。假手术组仅游离左侧颈总动脉, 不注射任何药物。所有实验动物于注射药物后7 d处死, 进行脑组织病理检测、脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal deoxynucleoitidyl transferase dUTP nick end labeling, TUNEL)检测凋亡阳性神经细胞数目、Western印迹法检测caspase-3蛋白含量。采用单因素方差分析和LSD法进行统计学分析。结果 (1)与假手术组比较, 实验组和对照组左侧海马区脑组织病理损伤明显。实验组与对照组在0、6、12、24和48 h亚组比较, 病理损伤程度较轻, 72 h亚组无明显差异。(2)左侧海马区脑组织凋亡阳性神经细胞数目:实验组与对照组在0、6、12、24和48 h各亚组之间比较, 凋亡阳性神经细胞数目明显减少[(18.17±1.72)与(35.67±3.14)、(23.00±1.73)与(36.33±0.82)、(26.33±1.75)与(35.50±2.59)、(29.17±2.32)与(36.33±2.34)、 (31.54±1.69)与(35.72±1.94)个, P值均<0.05];而72 h亚组之间2组比较差异无统计学意义(t=0.416, P>0.05)。实验组的各亚组之间依次比较, HIBD模型后越早注射BIP, 凋亡阳性细胞数目越少, 且差异有统计学意义(F=57.242, P<0.01)。(3)左侧海马区脑组织caspase-3蛋白含量检测提示, 实验组在0、6、12、24、48 h各亚组均低于对照组(0.164±0.031与0.474±0.090、0.262±0.030与0.473±0.054、0.338±0.021与0.472±0.120、0.379±0.018与0.481±0.068、0.407±0.026与0.478±0.081, P值均<0.05), 而72 h亚组之间2组比较差异无统计学意义(t=0.027, P>0.05)。实验组各亚组之间比较, HIBD模型后越早注射BIP, 脑组织内caspase-3含量越少, 差异有统计学意义(F=51.053, P<0.01)。结论 BIP可明显减少新生鼠HIBD后凋亡神经细胞数目、降低caspase-3的表达、抑制缺氧缺血后脑组织神经细胞凋亡。缺氧缺血后48 h内是BIP治疗HIBD的有效治疗时间窗, 且越早治疗效果越好。

• 单位
  青岛大学医学院附属医院