人胎盘间充质干细胞的扩增与鉴定

作者：马晨; 李晓国; **均; 马晓娜; 马晓薇^*

来源：中国组织工程研究, 2019, 23(33): 5293-5299.

• 人胎盘间充质干细胞
• hpMSC
• 传代培养
• 成脂诱导
• 成骨诱导
• 成软骨诱导
• 流式细胞术

背景:作为组织工程的种子细胞,胎盘间充质干细胞因具有多向分化、低免疫原性、免疫调节等作用,被广泛用于临床疾病的治疗及临床科研中。目的:根据间充质干细胞的定义来鉴定从宁夏医科大学总医院干细胞研究所获得的人胎盘间充质干细胞,为后续的实验提供可靠的保障。方法:培养从宁夏医科大学总医院干细胞研究所获得的人胎盘间充质干细胞,观察其在塑料培养皿或培养瓶内的贴壁情况,并间断观察细胞形态发生的变化。将培养的第3代人胎盘间充质干细胞通过流式细胞技术检测细胞表面特异性抗原,并且用成脂、成骨、成软骨诱导培养基分别诱导21 d后,采用油红O、茜素红、甲苯胺蓝进行细胞染色观察人胎盘间充质干细胞向脂肪、骨,软骨细胞的分化能力。实验方案得到宁夏医科大学总医院医学科研伦理审查委员会批准(编号:2018-047)。结果与结论:(1)经过体外培养的第3代人胎盘间充质干细胞呈漩涡状贴壁生长,单个细胞呈梭状,形似纤维细胞;(2)人胎盘间充质干细胞具有特殊的细胞免疫学表型:流式细胞术检测CD105、CD90、CD73呈强阳性表达;造血标记物CD34、CD45、CD14以及HLA-DR呈阴性表达;(3)人胎盘间充质干细胞在成脂、成骨、成软骨诱导培养21 d后,油红O染色、茜素红染色及甲苯胺蓝染色均呈阳性。提示:根据间充质干细胞的定义,来自宁夏医科大学总医院干细胞研究所的人胎盘间充质干细胞符合间充质干细胞的特性,为后续实验提供良好保证。

• 单位
  宁夏医科大学总医院; 宁夏医科大学