结核分枝杆菌esat6-mpt64融合基因真核表达载体的构建

作者：柏银兰; 薛莹; 徐志凯; 高辉; 王丽梅; 师长宏; 张海

来源：生物技术通讯, 2007, (02): 196-198.

• 结核分枝杆菌
• esat6
• mpt64
• 真核表达 Mycobacterium tuberculosis
• esat6
• mpt64
• expression

目的:构建结核分枝杆菌分泌蛋白基因esat6-mpt64的真核表达载体。方法:用PCR法从结核分枝杆菌H37Rv株基因组中分别扩增esat6、mpt64基因,插入pGEM-T-easy载体,序列测定正确后,将其亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1( );重组质粒经酶切鉴定正确后,用LipofectAMINE2000转染COS-7细胞;用RT-PCR检测mRNA的表达,用间接免疫荧光技术检测目的蛋白的表达。结果:RT-PCR表明esat6-mpt64融合基因可在COS-7细胞中转录;用间接免疫荧光检测,有表达蛋白的细胞着染。结论:构建了真核表达载体pcDNA-esat6-mpt64,并在真核CO...

• 单位
  第四军医大学