抗Fas核酶对小鼠T细胞凋亡的抑制作用(英文)

作者：张敏; 陈智超; 田蕾; 刘芳; 刘陵波; 游泳; 邹萍

来源：癌症, 2005, (05): 520-524.

• T细胞
• 凋亡
• 免疫
• 核酶
• 肿瘤

背景与目的:肿瘤细胞可表达FasL,从而诱导表达Fas的T细胞凋亡,即肿瘤细胞的“Fas反击作用”。本研究通过检测抗Fas核酶对小鼠T细胞凋亡的抑制作用,探索增强T细胞抗肿瘤能力的新途径。方法:设计并合成针对小鼠Fas基因的锤头状核酶,检测其对Fas m RNA的体外切割能力。通过电穿孔转染法将其导入小鼠脾脏T细胞,同时设立空白对照组和空载体转染组,通过逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polym erase chain reaction,RT-PCR)、W estern blot检测细胞上Fas的表达。细胞经抗Fas的抗体(JO2)作用后,流式细胞仪检测细胞凋亡,M TT法测转染前后细胞的增殖,以乳酸脱氢酶试验检测细胞毒性T细胞的体外杀伤活性。结果:抗Fas核酶能显著切割Fas m RNA,切割效率为60%。核酶组细胞表面的Fas水平显著低于对照组及空载体组(0.4vs.1.1,1.0,P<0.01)。经抗Fas抗体处理后,核酶组细胞的凋亡率明显低于对照组及空载体组(35%vs.86%,87%,P<0.01);核酶组的细胞增殖活性显著高于对照组及空载体组(208%vs.100%,98%,P<0.01);核酶组T细胞的体外杀伤活性明显强于其它2组细胞(67%vs.32%,31%,P<0.01)。结论:抗Fas核酶能显著降低小鼠脾脏T细胞的Fas水平,使细胞免于Fas途径的凋亡,从而增强T细胞的抗瘤能力。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院