白藜芦醇诱导大鼠原代脂肪细胞凋亡及机制

作者：陈思凡; 周妮曼; 郑琳; 柯梁汝; 单智铭; 冯翔

来源：中山大学学报(医学科学版), 2010, 31(05): 619-623.

DOI：10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2010.0119

• 白藜芦醇
• 凋亡
• 沉默信息调节因子1
• 细胞色素C
• 半胱天冬氨酸酶

【目的】探讨白藜芦醇(Res)对大鼠原代脂肪细胞凋亡的影响及其机制。【方法】培养大鼠原代脂肪细胞,添加不同剂量的Res干预,用Hoechst 33258染色,在荧光显微镜下观察细胞核形态;用DNA Ladder实验观察DNA断裂的条带;检测各组培养基和细胞内的乳酸脱氢酶(LDH)含量,计算LDH漏出率;用流式细胞仪测定细胞凋亡率;Western blot检测相关位点,包括沉默信息调节因子1(Sirt1)、细胞色素C(Cytochrome C)、半胱天冬氨酸酶家族(Caspase 9和Caspase 3)的蛋白质表达。【结果】经过Res干预后,细胞核染色质高度凝集,电泳后出现180～200bp整数倍的寡核苷酸片段。细胞LDH漏出率升高,呈剂量-反应关系(P<0.05或P<0.01)。Res作用后细胞凋亡率明显上升,呈剂量-反应关系(P<0.01)。Sirt1、Cytochrome C、活化的Caspase 9及Caspase 3表达水平上升,胞浆Cytochrome C释放也增加。【结论】Res促进原代脂肪细胞凋亡,其机制可能是通过增加Sirt1表达,经由线粒体凋亡途径,作用于Caspase 9和Caspase 3。

• 单位
  中山大学中山医学院; 中山大学公共卫生学院