从单个兔B细胞获得抗人cGAS蛋白单克隆抗体

作者：傅雅娟; 陈苏星; 蔡少丽; 林莉莉; 林清强^*

来源：福建师范大学学报(自然科学版), 2019, 35(06): 75-80.

• cGAS
• 单细胞
• B细胞
• 抗体

为研究环鸟苷酸-腺苷酸合成酶入核的机制,利用兔外周血B细胞筛选抗人cGAS蛋白单克隆抗体.针对已三次免疫人cGAS(161-522)蛋白的新西兰兔,运用流式细胞术得到阳性效应B细胞,在单管里对单细胞裂解,得到总RNA,逆转录生成cDNA,两步巢式PCR扩增同一个B细胞来源的抗体重链和轻链可变区序列,抗体基因扩增成功率高达80%以上.293T重组表达兔抗人cGAS蛋白单克隆抗体并鉴定,获得1个具有较好结合特异性的兔抗人cGAS蛋白单克隆抗体,ELISA检测结果显示抗体的效价达1∶10 000.

• 单位
  生命科学学院; 福建师范大学