摘要

本文探讨DNATyper mtDNA-SNP60TM试剂盒在案件中应用的可行性。应用DNATyper mtDNA-SNP60TM试剂盒对100个汉族无关个体和20组全同胞进行mtDNA SNP检验;取25 pg/μL马、牛、羊、猪、鸡、鸭、猫、狗、兔、鼠和大肠杆菌的DNA样品进行种属特异性测试;取5、10、20、40μmol/L血红素进行抗抑制性测试;取两个批次的DNATyper mtDNA-SNP60TM试剂盒经反复冻融10次后进行稳定性测试;分别应用VeriFilerTM Plus PCR扩增试剂盒和DNATyper mtDNA-SNP60TM试剂盒对100份陈旧、腐败、降解检材进行检验。结果表明,100个汉族无关个体均获得清晰的mtDNA SNP分型结果,其检验结果与通过mtDNA测序获得的结果完全一致;100个汉族无关个体含有100种不同的单倍型;20组全同胞中每组个体之间mtDNA SNP分型结果相同;DNATyper mt DNA-SNP60TM试剂盒对马、牛、羊、猪、鸡、鸭、猫、狗、兔、鼠和大肠杆菌的DNA样品进行检测,均未出现特异性分型,表明该试剂盒具有较好的种属特异性;当血红素浓度≤40μmol/L时,所有mtDNA SNP位点均获得正确分型,表明该试剂盒具有一定的抗血红素能力;两个批次的DNATyper mtDNA-SNP60TM试剂盒经反复冻融10次后,所有mtDNA SNP位点均可正确分型,表明该试剂盒具有较好的稳定性;对于100份陈旧、腐败、降解检材,STR检出率为55%,mtDNA SNP的检出率为86%,mtDNA SNP的检出率显著高于STR。当模板DNA浓度大于5pg/μL时,DNATypermtDNA-SNP60TM试剂盒能得到完整的分型谱图。综上,DNATyper mt DNA-SNP60TM试剂盒可应用于陈旧、腐败、降解检材的检验,具有很好的实战应用价值。

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