人β_2-微球蛋白基因的克隆与原核中的表达

作者：孙万军; 徐东刚; 杜建芳; 邹民吉; 王金凤; 蔡欣; 王嘉玺; 艾辉胜

来源：中国实验血液学杂志, 2006, (03): 521-524.

• &beta
• 2-微球蛋白
• MHCⅠ类分子
• 基因表达
• 基因克隆 &beta
• _2-microglobulin
• MHC class Ⅰ
• gene expression
• gene clone

本研究获取主要组织相容性复合体(MHC)Ⅰ类分子的轻链部分,即β2-微球蛋白(β2m)以制备MHCⅠ类分子-肽四聚体。根据已报道的序列设计特异引物,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法从人白细胞中克隆β2m的基因,并构建β2m的原核表达载体,在大肠杆菌中进行表达。结果显示:构建的编码成熟β2m的pET-β2m可在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达β2m,表达量占菌体总蛋白的32%,β2m以包涵体的形式表达,经洗涤、变性后,以SephacrylS-200HR(S-200)柱层析纯化,纯度可达95%以上,纯化产物采用稀释法复性。Westernblot分析表明,该蛋白具有与抗人天然β2m抗体...

• 单位
  军事医学科学院基础医学研究所; 军事医学科学院附属医院