摘要
目的探讨长链非编码RNA CDRT8在食管癌组织中的表达及其对食管癌细胞增殖的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测13对食管癌组织和癌旁组织,比较CDRT8的表达水平。设计并合成针对CDRT8的特异性短发卡RNA(shRNA)模板,构建CDRT8-shRNA重组质粒,转染TE-1细胞,以转染阴性对照质粒为对照组。流式细胞术检测细胞周期,噻唑蓝(MTT)比色法和集落形成实验分别检测细胞活力和增殖能力。qPCR和Western blot检测细胞中Yes相关蛋白1(YAP1)、细胞周期蛋白E(Cyclin E)和细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)的表达水平。比较CDRT8-shRNZ组和对照组细胞周期进展情况、细胞活力、细胞增殖能力以及YAP1、Cyclin E和CDK2蛋白表达水平。结果食管癌组织中CDRT8表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01),CDRT8-shRNA组的CDRT8表达水平显著低于对照组(P<0.05)。CDRT8-shRNA组细胞周期进展受到抑制(P<0.05),细胞活力和增殖能力下降(P<0.05),YAP1、Cyclin E和CDK2蛋白表达水平显著下调。结论 CDRT8在食管癌组织中呈高表达,干扰CDRT8表达可显著抑制TE-1细胞周期进展和细胞增殖,CDRT8可能通过YAP1基因参与调控食管癌的发生发展。
-
单位利川市人民医院; 吉林大学中日联谊医院; 重庆市黔江中心医院