沉默信息调节因子1对抗APP高表达转基因小鼠脑组织及β-淀粉样肽寡聚体处理的原代培养神经元中氧化应激水平升高的作用

作者：董阳婷; 曹坤; 向洁; 徐毅; 谭龙春; 王晓玲; 齐晓岚; 肖雁; 官志忠

来源：神经药理学报, 2018, 8(02): 32-33.

• 寡聚体
• 老年斑
• 氧化应激水平
• β-淀粉样肽
• 小鼠脑组织
• 原代培养神经元
• 沉默信息调节因子
• APP

目的:由于氧化应激水平升高是阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的可能性发病机制之一,而沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)的功能与抗氧化有关,本文试图了解SIRT1是否能对抗β-淀粉样肽前体蛋白(APP)高表达的小鼠大脑或经β-淀粉样肽寡聚体(AβOs)处理的神经元中氧化应激水平的升高。方法:APP/PS1双转基因种鼠与野生型(WT)雌鼠合笼繁殖,筛选出APP/PS1双转基因小鼠,分别饲养至4月龄或8月龄时,用白藜芦醇(RSV,SIRT1激活剂)或苏拉明(SIRT1抑制剂)通过灌胃方法处理转基因小鼠,每次20 mg·kg-1体重/天,时间2个月;采用原代海马神经元培养,用0.5μmol·L-1 AβOs处理48小时后分别用20μmol·L-1RSV或300 mg·mL-1苏拉明处理细胞24小时。采用CCK-8方法检测细胞存活率,筛选最佳药物处理浓度;用蛋白印记及实时定量PCR方法分别检测SIRT1蛋白和mRNA表达水平;用免疫组织化学方法检测APP高表达转基因小鼠脑组织内老年斑分布情况;用激光共聚焦显微镜及流式细胞术检测原代海马神经元中活性氧(ROS)水平;用生物化学方法检测小鼠脑组织及细胞中OH-、H2O2、O2.-水平,丙二醛(MDA)含量,以及超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果:与WT小鼠或未经处理的原代神经元相比,APP/PS1小鼠大脑或经AβOs处理的神经元中SIRT1的表达显着降低;小鼠脑组织中老年斑数量明显增加;脑组织及培养神经元中氧化应激水平明显升高,抗氧化酶水平明显降低。APP/PS1小鼠大脑或经AβOs处理的神经元中这些异常改变可通过RSV处理后减弱,而用苏拉明处理后则使其增强。结论:SIRT1可以降低APP高表达小鼠大脑及经AβOs处理的神经元中的氧化应激水平,具有神经保护作用。

• 单位
  贵州医科大学