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摘要
〔目的〕研究一种相思子毒素抗原、抗体的制备技术。〔方法〕根据相思子毒素对半乳糖的特异性结合能力,采用亲和层析技术将相思子种子中大部分杂质除去;经凝胶过滤层析,进一步去除植物种子中与蛋白毒素并存的凝集素,获得电泳纯度天然相思子毒素纯品。〔结果〕利用大肠埃希菌表达重组相思子毒素A链蛋白,经金属螯合层析法纯化,得到重组相思子毒素A链蛋白抗原。重组抗原免疫大耳白兔、昆明小鼠,采用辛酸-硫酸铵盐析法和亲和层析法纯化兔血清和鼠腹水获得多抗;2种抗体与天然毒素特异性结合的活性效价均为106。〔结论〕抗原、抗体的制备为建立相思子毒素检测方法奠定了基础。
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单位中国检验检疫科学研究院; 病原微生物生物安全国家重点实验室; 军事医学科学院
