H3N8亚型马流感病毒间接ELISA抗体检测方法建立及应用

作者：郭巍; 王英原; 王宇; 张馨心; 赵立平; 王立群; 相文华

来源：中国预防兽医学报, 2010, (03): 190-193.

• 马流感
• 间接ELISA
• 抗体检测 Equine influenza
• Indirect ELISA
• detection of antibody

为建立马流感血清学ELISA诊断方法,本研究以马流感病毒中国分离株A/马/新疆/07(H3N8)通过SPF鸡胚培养和增殖,收取含病毒尿囊液经蔗糖密度梯度离心纯化后作为ELISA包被抗原,首次在我国建立了检测H3N8亚型马流感抗体的间接ELISA诊断方法。试验的最佳反应条件为:最佳抗原稀释度7μg/mL,封闭液5%脱脂乳,血清稀释度1∶100,二抗稀释度1∶10000,稀释液PBS(pH7.4),血清反应时间1.5h,二抗反应时间1h。通过本方法对555份临床样品进行检测并与血凝抑制(HI)试验检测结果比较,证明本方法特异、敏感,具有良好的稳定性和可重复性,适于马流感的流行病学调查和监测工作。

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 东北农业大学; 生命科学学院; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所