华中五味子AFLP反应体系的建立

作者：罗成; 刘锦; 顾蔚; 张琛; 王喆之

来源：生物技术, 2009, 19(02): 37-40.

DOI：10.16519/j.cnki.1004-311x.2009.02.030

• 华中五味子
• AFLP
• 反应体系 Schisandra sphenanthera Rehd. et Wils.
• AFLP
• reaction system

目的:建立一个适于华中五味子研究用的AFLP反应体系。方法:以华中五味子硅胶干燥嫩叶为试材,采用改良CTAB法提取到高质量DNA。通过琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳对MseⅠ/EcoRⅠ双酶切、连接、预扩增和选择性扩增过程中的关键因素进行分析。结果:双酶切6h,片段主要集中在250～2000bp;连接产物和预扩增产物最适稀释倍数均为10倍;预扩增产物经选择性引物E-ACT/M-CAT和E-ACA/M-CAG扩增,琼脂糖电泳检测其主带分别集中在250～375bp和500～750bp,6%聚丙烯酰胺凝胶电泳检测及银染,条带清晰可辨。结论:该体系具有稳定性高、重复性好等优点,可用于华中五味子AF...

• 单位
  生命科学学院; 陕西师范大学