摘要

目的 探讨柚皮素对胰腺癌细胞PANC-1增殖和凋亡的影响及糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)在其中的作用。方法 PANC-1细胞根据随机数字表分为7组(每组12孔,细胞密度为2 500个/mm2):0μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L、control virus和GSK-3β virus组。0μmol/L组,加入相应体积溶剂;50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L和400μmol/L分别在培养液中加入终浓度为50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L和400μmol/L的柚皮素进行培养;Control virus组,感染了对照病毒的PANC-1细胞培养液中加入200μmol/L的柚皮素进行培养;GSK-3β组,感染了GSK-3β过表达慢病毒的PANC-1细胞培养液中加入200μmol/L柚皮素。CCK-8检测细胞活力,细胞计数仪测定细胞数量,流式细胞测量凋亡细胞百分比,Western blot方法检测Ki-67、cleaved caspase-3、GSK-3β和p-GSK-3β的蛋白表达水平;RT-PCR法测定GSK-3β的mRNA表达水平;免疫荧光法检测Ki-67阳性细胞数量。结果 与0μmol/L组比较,100μmol/L、200μmol/L和400μmol/L组细胞活力、细胞增殖倍数、Ki-67阳性细胞比例、Ki67蛋白表达水平、GSk-3β和p-GSK-3β表达水平降低(P<0.05),细胞凋亡百分比和cleaved caspase-3表达量增加(P<0.05);与100μmol/L组比较,200μmol/L和400μmol/L组细胞活力、细胞增殖倍数、Ki-67阳性细胞比例、Ki67蛋白表达水平、GSk-3β和p-GSK-3β表达水平进一步下降(P<0.05),细胞凋亡百分比和Cleaved caspase-3表达量进一步增加(P<0.05);200μmol/L与400μmol/L组相比以上指标均无差异(P>0.05);与NA+control virus组相比较,NA+GSK-3β组Ki-67阳性细胞比例、Ki67蛋白表达水平增加(P<0.05),细胞凋亡百分比和Cleaved caspase-3表达量下降(P<0.05)。结论 柚皮素通过降低GSK-3β的表达及活性抑制PANC-1细胞增殖并促进细胞凋亡。