骨桥蛋白在高钙促进大鼠肾上皮细胞与草酸钙晶体黏附中的作用

作者：席启林; 刘喆; 侯建全; 欧阳骏; 浦金贤; 刘安定; 王少刚; 叶章群

来源：中华实验外科杂志, 2014, 31(08): 1762-1765.

• 高钙尿
• 骨桥蛋白
• 肾上皮细胞

目的探讨骨桥蛋白(OPN)在高钙尿致含钙肾结石形成中的作用及机制。方法根据成人及大鼠高钙尿诊断标准,钙干预浓度分别为0.1、0.3、0.6 g/L,作用于大鼠肾上皮细胞(NRK),检测其对NRK细胞增殖、分泌OPN及OPN基因表达的影响;构建有效沉默OPN基因表达的慢病毒载体[OPN-RNA干扰(RNAi)],感染NRK细胞后应用高钙刺激,检测细胞黏附的一水草酸钙晶体量的变化。结果 0.3、0.6g/L钙刺激NRK细胞6、24、48 h后,3个时间点检测NRK细胞增殖均较空白对照组明显减慢,差异有统计学意义(P<0.05);3个浓度钙刺激3、6、24 h后OPN分泌量均较空白对照组显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);3个浓度干预3 h和6 h两个时间点NRK细胞OPN基因mRNA和蛋白水平均明显升高,与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);成功构建OPN-RNAi慢病毒载体,病毒滴度为6×108TU/ml。OPN-RNAi组、空病毒载体组和空白对照组分别用0.6 g/L钙干预24 h后细胞黏附的一水草酸钙含量(以钙浓度表示,mg/L)分别为19.25±3.71、27.22±3.82和31.91±1.15;OPN-RNAi组细胞晶体黏附量较空病毒载体组和空白对照组均显著减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 OPN可能介导高钙促进NRK细胞与一水草酸钙晶体的黏附。

• 单位
  无锡市第二人民医院; 苏州大学附属第一医院; 华中科技大学同济医学院附属同济医院