鼻病毒非结构蛋白2B引起细胞自噬产生的研究

作者：宋娟; 邹小辉; 罗小暖; 宋芹芹; 史冰田; 夏冬; 刘宓; 夏志强; 鲁茁壮^*; 韩俊^*

来源：中华实验和临床病毒学杂志, 2019, 33(01).

• miniSOG
• 2B蛋白
• 自噬

目的利用miniSOG标签观察鼻病毒非结构蛋白2B蛋白在细胞中定位及自噬体产生。方法将非结构蛋白2B和miniSOG进行融合表达构建pcDNA3.1-2B-miniSOG-flag质粒, 将质粒转染HEK293细胞, 在荧光显微镜下, 2B-miniSOG阳性细胞进行固定、光氧化及超薄切片制备, 电镜下观察2B-miniSOG蛋白在细胞中的定位及细胞超微结构变化, Western blot(WB)检测LC3的表达。结果 2B-miniSOG蛋白在荧光显微镜下发出绿色荧光, WB检出自噬标志性蛋白LC3-II表达增加。电镜下观察到蛋白定位于线粒体, 细胞中出现大量囊泡样结构, 可观察到自噬体和自噬溶酶体。结论鼻病毒非结构蛋白2B可引起细胞自噬发生。

• 单位
  传染病预防控制国家重点实验室; 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所