肉牛MSTN基因miRNA干扰载体的构建及干扰效果验证

作者：郑艳玲; 郑月茂; 姜八一; 王勇胜; 张涌^*

来源：动物医学进展, 2022, 43(10): 7-11.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2022.10.016

• MSTN基因
• miRNA
• 干扰载体
• 干扰效果

构建肉牛MSTN基因的miRNA特异性干扰载体，并在肉牛骨骼肌卫星细胞中验证其有效性。设计4对肉牛MSTN基因特异性miRNA寡聚单链DNA序列，分别克隆在pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR上，构建MSTN基因miRNA的干扰载体，转染肉牛骨骼肌卫星细胞，实时荧光定量PCR及Western blot分别用于检测MSTN基因mRNA及蛋白表达量，结果显示，成功构建了4个miRNA干扰载体miR-MSTN-1、miR-MSTN-2、miR-MSTN-3及miR-MSTN-4。4个载体均能有效下调MSTN mRNA及蛋白的表达，其中miR-MSTN-4的干扰效果最好。说明成功构建针对肉牛MSTN基因的miRNA特异性有效干扰载体，为通过MSTN基因的miRNA干扰生产高产肉性能肉牛的研究奠定了基础。

• 单位
  山东畜牧兽医职业学院; 西北农林科技大学