Klotho促进高糖介导的人肾小管上皮细胞的自噬

作者：薛萌; 杨烽; 梁倩; 王炳森; 乐颖; 梁真^*

来源：中国医师杂志, 2022, 24(06): 844-848,853.

DOI：10.3760/cma.j.cn431274-20210817-00896

• 肾小管
• 上皮细胞
• Klotho蛋白
• 自噬

目的探讨Klotho通过腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)和胞外信号调控激酶(ERK)途径对高糖条件下人肾小管上皮细胞自噬的影响。方法将体外培养人肾小管上皮细胞分为对照组和高糖(HG组, 加入30 mmol/L葡萄糖);按照转染pcDNA3.1-Vector或pcDNA3.1-Klotho分为两组:Vector组和Klotho组;按照转染pcDNA3.1-Klotho后是否加入AMPK抑制剂compound C或ERK抑制剂curcumin和高糖刺激分为4组:HG+Vector组、HG+Klotho组、HG+Klotho+compound C组和HG+Klotho+curcumin组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)法检测各组细胞Klotho的表达;Western blot法检测LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ, p-AMPK/AMPK和p-ERK/ERK的相对表达;透射电镜观察人肾小管上皮细胞自噬体的变化。结果 HG组人肾小管上皮细胞中Klotho蛋白和mRNA相对表达量显著低于对照组(均P<0.05);Klotho组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ显著高于Vector组(P<0.05);Klotho组的自噬体数量也较Vector组明显增加(P<0.05);Klotho组p-AMPK/AMPK显著高于Vector组(P<0.05), 而p-ERK/ERK显著低于Vector组(P<0.05)。HG+Klotho+compound C组中p-AMPK/AMPK蛋白相对表达量(0.44±0.04)显著低于HG+Klotho组(0.79±0.08)(P<0.01), HG+Klotho+curcumin组中p-ERK/ERK蛋白相对表达量(1.05±0.12)显著高于HG+Klotho组(0.56±0.05)(P<0.01)。HG+Klotho+compound C组和HG+Klotho+curcumin组中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白相对表达量(0.79±0.12;0.68±0.09)显著低于HG+Klotho组(1.65±0.20)(均P<0.01)。结论 Klotho可通过激活AMPK和抑制ERK通路增强高糖条件下人肾小管上皮细胞的自噬。

• 单位
  南方医科大学南方医院; 南方科技大学; 暨南大学; 深圳市人民医院; 第二临床医学院