猪流产衣原体实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

作者：周丹娜; 李文浩; 阮征; 刘威; 郭锐; 杨克礼; 段正赢; 袁芳艳; 刘泽文; 陈文杰; 孟丽; 焦祖武^*; 田永祥^*

来源：动物医学进展, 2018, 39(09): 1-5.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2018.09.001

• 猪流产衣原体
• 实时荧光定量PCR
• momp基因
• 诊断方法

为建立一种快速、准确检测猪流产衣原体(Chlamydophila abortus,C.abortus)实时荧光定量PCR检测方法,根据C.abortus主要外膜蛋白(MOMP)的基因序列设计1对引物和1条分子探针(FAM和Dabycl标记),以构建的重组质粒作为标准阳性质粒,通过筛选和条件优化,建立了猪流产衣原体实时荧光定量PCR诊断方法。重复性、特异性及敏感性试验结果显示,重组质粒为标准品建立的标准曲线在1.0×102拷贝/μL1.0×107拷贝/μL内具有良好的线性关系,其相关系数为0.993 2,扩增效率为94.7%,灵敏度达到1.0拷贝/μL,批间批内变异系数(CV)为0.022%0.051%,建立的方法可有效区分流产衣原体、猪支原体、猪衣原体、肺炎衣原体及猪蓝耳病毒等病原,具有良好的临床应用前景。

• 单位
  湖北省农业科学院畜牧兽医研究所; 农业部