摘要
目的评价右美托咪定对肾缺血再灌注损伤小鼠血清诱导肺微血管内皮细胞(PMVECs)损伤的影响。方法采用阻断双侧肾蒂60 min再灌注24 h的方法制备小鼠肾缺血再灌注损伤模型。小鼠原代PMVECs接种于培养孔,采用随机数字表法分为3组(n=20):对照组(C组)、缺血再灌注小鼠血清组(I/R组)和右美托咪定组(Dex组)。C组采用10%假手术小鼠血清培养,I/R组采用10%肾缺血再灌注损伤小鼠血清孵育,Dex组于血清孵育前3 h用终浓度为0.1μmol/L右美托咪定孵育。细胞用相应培养基或血清培养或孵育24 h时,采用CCK8法确定细胞存活率,Hoechst33258染色法确定细胞凋亡率,采用比色法测定caspase-3活性,采用Western blot法检测Bcl-2和Bax的表达水平。结果与C组比较,I/R组和Dex组细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,caspase-3活性升高,Bcl-2表达下调,Bax表达上调(P<0.01);与I/R组比较,Dex组细胞存活率升高,细胞凋亡率降低,caspase-3活性降低,Bcl-2表达上调,Bax表达下调(P<0.01)。结论右美托咪定可减轻肾缺血再灌注损伤小鼠血清诱发的PMVECs损伤,机制与调控Bcl-2和Bax表达水平,抑制线粒体途径凋亡有关。
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单位第三军医大学第一附属医院