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摘要
目的从噬菌体展示肽库中筛选出能够用于血清学筛查的多肽。方法利用M13噬菌体随机展示肽库,对15例临床确诊肝癌患者的血清和15例正常体检者的血清进行4轮吸附-洗脱筛选。挑取筛选后的噬菌体单克隆,用血清试验筛选特异性及阳性率较高的单克隆。目标单克隆通过DNA测序确定其表达的多肽序列,进而人工合成带FITC标记的多肽,再对血清进行鉴定。结果随机挑取的50个经过4轮筛选的噬菌体单克隆。通过血清试验,从中筛选出9个特异性和确诊率较高的单克隆,其中单克隆ZH-3对肝癌血清确诊率达到46.7%。ZH-3经DNA测序分析,确定其表达的多肽序列为:SAHGTSTGVPWP。结论 ZH-3多肽在肝癌患者血清中有一定的检出率,提示ZH-3多肽能够为研发肝癌诊断试剂奠定基础。
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单位广州医学院附属广州市第一人民医院; 广东药学院
