阿克替苷通过激活血红素加氧酶-1抑制H2O2诱导的视网膜神经节细胞氧化损伤

作者：李晓勇; 孟凡颖; 白赫南^*

来源：眼科新进展, 2022, 42(09): 694-698.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2022.0142

• 视网膜神经节细胞
• 氧化应激
• 阿克替苷
• 血红素加氧酶-1

目的 研究阿克替苷对视网膜神经节细胞(RGC-5)的保护作用及其机制。方法 将RGC-5细胞分为对照组、H2O2组、阿克替苷+H2O2组(1μmol·L-1、10μmol·L-1、30μmol·L-1阿克替苷分别预处理细胞2 h),MTT法检测各组细胞活力；后续实验阿克替苷+H2O2组选择阿克替苷30μmol·L-1作为治疗浓度，荧光探针H2DCF-DA检测活性氧(ROS)产生和罗丹明123检测线粒体膜电位，Western blot检测各组细胞中Bcl-2、Bcl-2/Bax、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达。机制研究中首先用不同浓度阿克替苷单独处理RGC-5细胞24 h, Western blot检测血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达水平，进一步锌原卟啉(ZnPP)预处理RGC-5细胞1 h,而后30μmol·L-1阿克替苷单独预处理后与200μmol·L-1 H2O2共孵育24 h,通过MTT法测定细胞活力。结果 与对照组相比，H2O2组中细胞活力明显降低(P<0.01)。与H2O2组相比，阿克替苷+H2O2组中10μmol·L-1、30μmol·L-1阿克替苷预处理可显著提高细胞活力(P<0.05、P<0.01)。与对照组相比，H2O2组RGC-5细胞ROS生成明显增加，线料体膜电位显著降低，同时Bcl-2/Bax比值降低和Caspase-3蛋白相对表达量增加(均为P<0.05)。与H2O2组相比，阿克替苷+H2O2组RGC-5细胞ROS生成减少，线粒体膜电位增加，Bcl-2/Bax比值提高，Caspase-3蛋白相对表达量减少(均为P<0.05)。与阿克替苷未处理组相比，阿克替苷剂量依赖性诱导HO-1蛋白的表达，与阿克替苷+H2O2组相比，加入ZnPP后细胞活力降低(P<0.01),说明HO-1抑制剂ZnPP降低了阿克替苷对H2O2损伤的抑制作用。结论 阿克替苷能够通过上调HO-1表达抑制H2O2诱导的RGC-5氧化应激损伤。

• 单位
  赤峰学院附属医院; 赤峰市第二医院