吴茱萸碱对视网膜母细胞瘤细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响

作者：赵静; 杨洪涛^*; 裴存文

来源：眼科新进展, 2022, 42(11): 863-878.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2022.0178

• 视网膜母细胞瘤
• 吴茱萸碱
• 整合素β2-反义RNA1
• 细胞增殖
• 细胞周期
• 细胞凋亡

目的 探讨吴茱萸碱对视网膜母细胞瘤细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响，分析整合素β2-反义RNA1(ITGB2-AS1)在视网膜母细胞瘤中的表达和作用。方法 取对数生长期HXO-Rb44细胞铺在96孔板上，用终浓度为1μmol·L-1、2μmol·L-1、4μmol·L-1吴茱萸碱处理细胞24 h,记为吴茱萸碱1μmol·L-1组、吴茱萸碱2μmol·L-1组、吴茱萸碱4μmol·L-1组，同时将不经吴茱萸碱处理的细胞设为对照组；按照Lipofectamine 2000试剂盒说明书将si-NC、si-ITGB2-AS1转染细胞，记为si-NC组、si-ITGB2-AS1组；将pcDNA、pcDNA-ITGB2-AS1转染细胞，再用4μmol·L-1吴茱萸碱处理，记为吴茱萸碱4μmol·L-1+pcDNA组、吴茱萸碱4μmol·L-1+pcDNA-ITGB2-AS1组。采用MTT法测定细胞存活率，平板克隆实验计数克隆形成数，流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况，qRT-PCR检测ITGB2-AS1表达。结果 吴茱萸碱2μmol·L-1组、吴茱萸碱4μmol·L-1组细胞存活率和克隆形成数较对照组、吴茱萸碱1μmol·L-1组减小，差异均有统计学意义(均为P<0.05);吴茱萸碱4μmol·L-1组细胞存活率和克隆形成数较吴茱萸碱2μmol·L-1组减小，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。吴茱萸碱2μmol·L-1组、吴茱萸碱4μmol·L-1组G0-G1期细胞比例较对照组、吴茱萸碱1μmol·L-1组下降，G2-M期细胞比例较对照组、吴茱萸碱1μmol·L-1组升高，差异均有统计学意义(均为P<0.05);吴茱萸碱4μmol·L-1组G0-G1期细胞比例较吴茱萸碱2μmol·L-1组下降，G2-M期细胞比例较吴茱萸碱2μmol·L-1组升高，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。吴茱萸碱2μmol·L-1组、吴茱萸碱4μmol·L-1组细胞凋亡率较对照组、吴茱萸碱1μmol·L-1组升高，ITGB2-AS1表达量较对照组、吴茱萸碱1μmol·L-1组降低，差异均有统计学意义(均为P<0.05);吴茱萸碱4μmol·L-1组细胞凋亡率较吴茱萸碱2μmol·L-1组升高，ITGB2-AS1表达量较吴茱萸碱2μmol·L-1组降低，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。si-ITGB2-AS1组ITGB2-AS1表达量、细胞存活率、克隆形成数和G0-G1期细胞比例均较si-NC组降低，G2-M期细胞比例、细胞凋亡率均较si-NC组升高，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。吴茱萸碱4μmol·L-1+pcDNA-ITGB2-AS1组细胞ITGB2-AS1表达量、细胞存活率和克隆形成数均较吴茱萸碱4μmol·L-1+pcDNA组升高，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。吴茱萸碱4μmol·L-1+pcDNA-ITGB2-AS1组G0-G1期细胞比例较吴茱萸碱4μmol·L-1+pcDNA组高，G2-M期细胞比例、细胞凋亡率较吴茱萸碱4μmol·L-1+pcDNA组低，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 吴茱萸碱通过抑制ITGB2-AS1表达降低视网膜母细胞瘤细胞增殖，阻滞G2-M期细胞周期，并促进细胞凋亡。

• 单位
  承德市中心医院