棘孢木霉(Trichoderma asperellum)产聚半乳糖醛酸酶的特性

作者：王恒震; 李化强^*; 吴菲菲; 陈琼; 张早明; 刘庆

来源：食品与发酵工业, 2020, 46(16): 99-104.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.023934

• 棘孢木霉
• 聚半乳糖醛酸酶
• 酶学特性
• 纯化

聚半乳糖醛酸酶是水解D-半乳糖醛酸α-1,4-糖苷键的酶,在食品工业特别是果蔬加工中具有重要意义。该文研究棘孢木霉(14636)所产聚半乳糖醛酸酶的酶学特性,采用硫酸铵沉淀法、透析袋透析,对粗酶液进行纯化,并以聚合烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)确定其分子质量大小。实验结果表明,该酶的活性区域在29.29～50.46 k Da,聚半乳糖醛酸酶的最适反应pH为4.0,在pH 3.0～5.0稳定性较好,最适温度为40℃,具有一定的热稳定性;在乙酸乙酸钠缓冲溶液中活性较高。催化性能表明,果胶是聚半乳糖醛酸酶的最佳底物,Km值为0.74 mg/m L,Vmax为3 100μg/min; Mn2+、Mg2+、Cu2+、Ca2+和Tritonx-100对酶有激活作用,Ca2+和Tritonx-100激活作用较强,Co2+、Zn2+、Ba2+、Li+、Fe2+、SDS和Tween-80对该酶有不同的抑制作用;贮藏特性研究表明,该酶即使在30℃下30 d仍保留70%以上酶活性。研究结果为果蔬清洁加工领域新型酶制剂的开发提供理论依据。

• 单位
  邵阳学院